原位真核细胞内三维蛋白质结构的原位测定

作者:admin 来源:未知 点击数: 发布时间:2019年06月16日

  东京都立大学的研究人员成功地确定了真核细胞内卵白质的高分辩率,三维布局。他们将“细胞内”核磁共振(NMR)光谱,生物反映器系统和尖端计较算法连系起来,初次确定了拥堵的细胞内情况中的卵白质布局。该手艺无望深切领会致病卵白的细胞内行为和新型药物筛选使用,从而能够原位察看卵白质对生化刺激的反映。

  真核细胞是很多生物的基石,包罗所有真菌,动物和动物。它们的内部布局很是复杂和多样,具有错综复杂的布局条理和分布在细胞骨架收集四周的大量生物大分子。这使得很难看出细胞内的每种卵白质在其天然情况中的感化,虽然晓得较着的生物医学好处,例如当细胞遭到化学刺激时,特定卵白质若何反映,如药物。

  为了应对这一挑战,来自东京都立大学的助理传授Teppei Ikeya和Yutaka Ito传授带领的团队对sf9培育的虫豸细胞内表达的特定卵白质进行了核磁共振(NMR)光谱丈量,这种细胞来历于一品种型的细胞。蛾幼虫普遍用于卵白质出产。该团队开创性的核磁共振工作曾经成功地阐了然细菌内部的高分辩率卵白质布局(非真核生物)。简单地将不异的手艺使用于sf9中的卵白质的问题细胞的方针卵白浓度光鲜明显降低,细胞寿命短,因而难以收集核Overhauser效应光谱(NOESY)的高质量多维核磁共振谱,这将供给相关分歧原子在各个分子内若何间隔的切确消息。因而,他们将基于稀少采样的快速核磁共振丈量方案与采用贝叶斯推理等统计手艺的最先辈计较方式相连系,这些方式可按照来自细胞内核磁共振的无限数量的布局消息无效地阐明卵白质布局。具有固有低活络度的光谱。在NMR安装内部还配备了生物反映器系统,其在丈量期间使细胞连结健康形态。

  操纵这一新数据,该团队可以或许以史无前例的高分辩率阐明三种模子卵白质的三维布局,对于卵白质主链原子的位置切确度为0.5埃(0.05纳米)。出格是,与稀释溶液中的参比布局比拟,他们在一种卵白质的局部区域中判定出光鲜明显分歧的构象。“在细胞中”和“在试管中”的卵白质之间的构象差别可能是由与细胞内其他分子的非特同性彼此感化惹起的。很较着,这些彼此感化有助于卵白质的生物学功能:,能够看到分歧的前提如神经退行性疾病若何影响原位卵白质构象,并定量丈量医治若何影响布局非常。

  原位真核细胞内三维卵白质布局的原位测定

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